Муравьев Алексей Сергеевич — студент VI курса лечебного факультета.
Ул. Льва Толстого, д. 6/8, Санкт-Петербург, 197022
Alexey S. Muraviev - VI year Student, Medical Faculty
6/8 L’va Tolstogo street, St Petersburg, 197022
Князева Анастасия Алексеевна—аспирант
Anastasia A. Knyazeva - PhD Student
Aleksandr N. Krutikov - External Researcher, Research Department of Infiltrative Myocardial Diseases, Institute of Molecular Biology and Genetics
Крутиков Александр Николаевич—внешний научный сотрудник научно-исследовательского отдела инфильтративных заболеваний сердца Института молекулярной биологии и генетики
Гудкова Александра Яковлевна — доктор медицинских наук, заведующая лабораторией кардиомиопатий Института сердечно-сосудистых заболеваний, профессор кафедры факультетской терапии ГБОУ ВПО ПСПбГМУ им. И. П. Павлова МР, внешний научный сотрудник Института молекулярной биологии и генетики ФГБУ ««НМИЦ им. В. А. Алмазова» МР
Aleksandra Ya. Gudkova - MD, PhD, DSc, Head, Laboratory of Cardiomyopathies, Institute of Cardiovascular Diseases, Professor, Department of Internal Diseases #1, First Pavlov SMUof St. Petersburg, External Researcher, Institute of Molecular Biology and Genetics, Almazov NMRC
Костарева Анна Александровна — кандидат медицинских наук, доцент кафедры факультетской терапии ГБОУ ВПО ПСПбГМУ им. И. П. Павлова МР, директор Института молекулярной биологии и генетики ФГБУ «НМИЦ им. В. А. Алмазова» МР
Anna A. Kostareva - MD, PhD, Associate Professor, Department of Internal Diseases #1, F irst Pavlov SMUof St. Petersburg, Director, Institute of Molecular Biology and Genetics, Almazov NMRC
Цель исследования — оценка экспрессии генаMADD при развитии гипертрофии миокарда, вызванной гемодинамическими факторами в модели коарктации аорты, а также в модели реноваскулярной артериальной гипертензии (модель «2 почки, 1 клипса»).
Материалы и методы. Работа выполнена на крысах линии Вистар (n = 60) в возрасте 8 недель. В целях моделирования гипертрофии миокарда использованы две экспериментальные модели: модель коарктации аорты (n = 30) и модель «2 почки, 1 клипса» (n = 21). Животные были разделены на группы в соответствии с длительностью эксперимента (1 и 10 недель), также была выделена группа интактных животных (n = 9). Формирование гипертрофии миокарда верифицировалось посредством эхокардиографии. После эвтаназии и забора миокарда ткани были гомогенизированы в среде Extract RNA reagent (Evrogen) с целью получения РНК. Комплементарную цепь ДНК получали посредством обратной транскрипции при помощи праймеров Random (dN) 10-primer (Evrogen) и MMLV RT kit (Evrogen). Определение относительного уровня экспрессии гена MADD в миокарде крыс проводили при помощи полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Уровень экспрессии рассчитывался при помощи метода ΔΔCt, в качестве референсного контроля использовались гены GAPDH и HPRT.
Результаты. В модели коарктации аорты экспрессия гена MADD в группе 1 недели была выше (р < 0,05) в сравнении с интактной группой; в данной модели выявлены корреляции экспрессии гена MADD с экспрессией гена NPPA в виде прямой зависимости, а также с такими показателями эхокардиографии, как конечный систолический размер, конечный диастолический размер, индекс массы миокарда, в виде прямой зависимости (р < 0,05) и со значением фракции укорочения в виде обратной зависимости (р < 0,05). В модели реноваскулярной гипертензии не выявлено значимого повышения экспрессии гена MADD в образцах миокарда животных экспериментальной группы по сравнению с интактными животными.
Заключение. Экспрессия гена MADD увеличивается преимущественно под действием остро развившейся гемодинамической перегрузки и, вероятно, имеет значение для формирования немедленного ответа со стороны кардиомиоцитов на фактор нагрузки давлением. Были обнаружены корреляции уровня экспрессии гена MADD с такими эхокардиографическими параметрами, как фракция укорочения, конечнодиастолический и конечно-систолический размеры левого желудочка.
Objective. The aim of the work was to evaluate the expression of the MADD gene during the development of myocardial hypertrophy caused by hemodynamic factors in the model of aortic coarctation, as well as in the model of renovascular arterial hypertension (model “2 kidney — 1 clip”).
Design and methods. The study involved Wistar rats (n = 60) at the age of 8 weeks. Two experimental models of myocardial hypertrophy were used: the aortic coarctation model (n = 30) and the “2 kidneys — 1 clip” model (n = 21). Animals were divided into groups according to the duration of the experiment (1 and 10 weeks), we also formed a group of intact animals (n = 9). Myocardial hypertrophy was verified by echocardiography. After euthanasia and myocardial extraction, the tissues were homogenized in Extract RNA reagent (Evrogen) in order to obtain RNA. A complementary DNA strand was obtained by reverse transcription using Random (dN) 10-primer (Evrogen) and MMLV RT kit (Evrogen) primers. The relative expression level of the MADD gene in rat myocardium was determined using real-time polymerase chain reaction. The expression level was calculated using the ΔΔCt method; the GAPDH and HPRT genes were used as a reference control.
Results. In the aortic coarctation model, MADD gene expression in the 1-week group was significantly higher (p < 0,05) compared with the intact group. In this model, there as a direct correlation of the expression of the MADD gene with NPPA gene, as well as with echocardiography indicators (final systolic size, final diastolic size, and myocardial mass index, p < 0,05), and an inverse relationship between MADD gene expression and the shortening fraction (p < 0,05). The renovascular hypertension model did not show a significant increase in the expression of the MADD gene in myocardium in experimental group compared to intact animals.
Conclusions. The expression of the MADD gene increases mainly under the influence of acute hemodynamic overload, and is likely to be important for the immediate response by cardiomyocytes to pressure load. Correlation was found between the expression level of the MADD gene and such echocardiographic parameters as the shortening fraction, end-diastolic and end-systolic sizes of the left ventricle.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.